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不一样的膜该如何挑选?

更新时间:2021-08-13点击次数:1249

01.根据实验需求选择合适的孔径

孔径通常由您的应用或使用目的来决定。支原体可以用0.1μm孔过滤器去除。大多数培养基、缓冲溶液、生物液和气体的常规实验室除菌通常采用0.22μm孔过滤器完成。溶液和溶剂的澄清和预过滤最好用0.45μm或孔径的过滤膜操作。

请参考下方,来为您的应用选择匹配的推荐膜和孔径。

# 0.1um去除支原体

# 0.22um水性溶液的除菌和超净处理、溶剂的超净处理(HPLC)

# 0.45um水性溶液的澄清、溶剂的澄清(HPLC)

Tip!

当试图控制支原体时,可同时加入环丙沙星过滤盐酸盐(HCl)。它是一种4-氟喹诺酮类抗生素常用来控制支原体受感染的污染细胞系


02.为您的应用选择最佳滤膜材质

Tip!

您的过滤器装置必须和样品的化学性质*相容。一些过滤膜含有可能对一些应用造成干扰的无毒的润湿剂。另一些滤膜可能结合蛋白质或其它大分子,从而导致过滤器过早堵塞或高价值样品的损失。因此,了解样品性质以及滤膜对与之接触的溶液的潜在影响是非常重要的。

聚醚砜(PES):滤膜强烈推荐用于过滤细胞培养基。PES结合蛋白质的能力和可提取物含量都非常低。PES膜的流速也高于纤维素或尼龙膜。

#醋酸纤维素酯膜(CA):滤膜对多数大分子的结合亲和力非常低,尤其适用于要求低蛋白结合作用的应用,例如含血清培养基的过滤。

#尼龙膜(聚酰胺NYLON):本质上是亲水性的,推荐用于对可提取物含量要求非常低的应用,因为它们不含任何润湿剂、清洁剂或表面活性剂。尼龙膜的耐化学性能较强,适于过滤腐蚀性较大的溶液,例如酒精和DMSO。

#特氟龙®(PEFE,聚四氟乙烯):膜本质上并且永远是疏水性的,适于过滤气体,包括增湿的空气。特氟龙膜的耐化学性良好,这使其非常适于过滤其它滤膜不能过滤的溶剂或其它腐蚀性化学品。由于其疏水性,特氟龙膜在过滤水性溶液以前必须用溶剂(例如乙醇)预先润湿。


03.选择合适滤膜直径以优化流速和膜通量

选择一个具有充足的容量或通量,从而能够快速高效地处理所有样品的过滤器。这主要取决于膜的有效表面积。

#过滤膜直径50mm 有效过滤面积19.6cm2,预计通量150-750ml

#过滤膜直径70mm 有效过滤面积39.5cm2,预计通量500-2500ml

#过滤膜直径91mm 有效过滤面积65cm2,预计通量1000-5000ml

较低值为粘性或含颗粒溶液的典型值;较高值为缓冲液或无血清培养基的典型值


Tip!

1.离心将去除大部分悬浮颗粒并减少过滤器堵塞,改善流速和吞吐量。

也可以预过滤减少颗粒负荷和过早的膜堵塞。

2.液体温度的影响

对于大多数应用,在室温下过滤溶液没有问题。通常增加溶液的温度会增加流速。例如,将细胞培养基的温度从4℃增加至37℃会使流速加倍。这最可能是由于培养基粘度的下降。但是,在一些情况下,较低温度下过滤会增加总通量,对血清等含蛋白质和脂肪的溶液尤其如此。

3.压差的影响

对于真空过滤,建议采用400mm Hg(7.73 psig)的压差(真空)。再增加压差只会使流速提高一点,但是可能导致过量泡沫的形成,因为滤出液中的气体会从溶液中逸出产生气泡。在过滤加入碳酸氢盐缓冲液的细胞培养基时这个问题尤其突出。在较高的压差下,培养基中溶解的二氧化碳将很快逸出,导致pH值上升,如果培养基中含有血清蛋白则形成过量的泡沫。


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